2-[[2- اتوکسی-4- ((4-هیدروکسی-1-پیپریدینیل) فنیل] آمینو]-5,11- دی هیدرو-5,11- دی متیل-6H-پیرمیدو[4,5-b][1,4] بنزودیازپین-6-

توضیحات محصول:

نام محصول: 2-[[2-Ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl) phenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimethyl-6H-pyrimido[4,5-b][1,4]بنزودیازپین-6- یک CAS NO:1234480-50-2

مترادف:

XMD 8-92 (پایه آزاد)

6H-پیرمیدو[4,5-b][1,4]بنزودیازپین-6-یک,2-[[2-ایتوکسی-4-(4-هیدروکسی-1-پیپریدینیل)فنیل]امینو]-5,11-دی هیدرو-5,11-دی متیل-؛

خواص شیمیایی و فیزیکی:

ظاهر: پودر سفید تا تقریبا سفید

آزمایش: ≥98.0%

تراکم:1.3 گرام/سم3

نقطه جوش:741.8 درجه سانتیگراد در دمای 760 mmHg

نقطه روشن شدن:402.4°C

در آزمایشگاه

XMD8-92 بیشترین وابستگی را به BMK1 با ثابت جدایی اندازه گیری شده (Kd) 80 nM نشان می دهد ، در حالی که DCAMKL2 ، TNK1 و PLK4 به ترتیب Kd ′s 190 ، 890 و 600 nM را نشان می دهند.XMD8-92 با استفاده از روش KiNativ در برابر تمام کینازهای قابل تشخیص در لیزات سلول های HeLa مورد بررسی قرار می گیرد و حدود 10 برابر بیشتر برای BMK1 با IC50 1 است..5 μM بیشتر از قوی ترین اهداف غیر هدف، TNK1 (IC50=10 μM) و ACK1 (TNK2، IC50=18 μM). دیگر اهداف غیر هدف ضعیف شامل دامنه کیناز 2 RSK1 و RSK2، PIK4A و PIK4B و FAK است.MEK5 به طور قابل توجهی توسط XMD8-92 در حداکثر 50 μM مهار نمی شود [1]. XMD8-92 در یک آزمایش رقابت در پیوند با سایت ATP در آزمایشگاه در برابر 402 کیناز و همچنین در روش KiNativ در برابر تمام کیناز های قابل تشخیص در لیزات سلول های HeLa، انتخاب پذیری بالایی نسبت به BMK1 نشان می دهد.XMD8-92 مانع فعال سازی BMK1 توسط EGF با IC50 240 nM و، با غلظت تا 5 μM، XMD8-92 هیچ اثر مهار کننده ای بر فعال سازی ERK1/2 توسط EGF [2] ندارد.

در زنده

XMD8-92 به طور قابل توجهی رشد تومور را در vivo تا 95٪ مهار می کند. داروسازی XMD8-92 در موش های Sprague-Dawley با استفاده از یک دوز وریدی یا خوراکی ارزیابی می شود. XMD8-92 دارای 2.زمان نیمه عمر 0 ساعت 26 میلی لیتر/ دقیقه/ کیلوگرمXMD8-92 دارای توزیع متوسط در بافت با حجم توزیع محاسبه شده 3.4 L/ kg است.پس از یک دوز خوراکی یکبار 2 mg/kg، حداکثر غلظت پلاسما حدود 500 nM در 30 دقیقه مشاهده می شود، با 34 nM باقی مانده 8 ساعت پس از دوز.غلظت بالای پلاسمای دارو (تقریباً 10 μM پس از مصرف IP 50 mg/kg) در طول 14 روز حفظ می شود.به نظر می رسد XMD8-92 به خوبی تحمل می شود و موش ها سالم به نظر می رسند و هیچ نشانه ای از اضطراب ندارند. عدم ثبات عروق در موش های تحت درمان XMD8-92 مشاهده نمی شود.درمان با XMD8-92 در موش های دارای توانایی ایمنی و کمبود ایمنی، رشد تومورهای غسل زینی ریه و دهانه رحم را مسدود کرد.، به ترتیب 95 درصد. This remarkable anti-tumor effect of XMD8-92 in lung and cervical xenograft tumor models is due to XMD8-92’s capacity to inhibit tumor cell proliferation through the PML suppression-inducted p21 checkpoint proteinعلاوه بر این، ضربه زدن BMK1 در موش ها منجر به حذف کامل و برگشت ناپذیر پروتئین BMK1 می شود.در حالی که درمان XMD8-92 در موش ها فقط فعالیت BMK1 را سرکوب می کند.، که قابل برگشت است. دوم، بی ثباتی عروقی مشاهده شده در موش های BMK1 KO ممکن است به دلیل عدم وجود دامنه غیر کیناز C-terminal BMK1 باشد.که هنوز هم در طول XMD8-92 درمان حیوانات وجود دارد [2].

آزمایش کیناز

پروفایل گذاری KiNativ از XMD8-92 با هر دو ATP و ADP acylphosphate-desthiobiotin با تغییرات زیر انجام می شود.لیزات سلول های هلا (۵ میلی گرم پروتئین کل در میلی لیتر) در حضور XMD8-92 در ۵۰ μM تزریق می شوند.، 10 μM، 2 μM، 0.8 μM و 0 μM برای 15 دقیقه قبل از اضافه کردن سُند ATP یا ADP acylphosphate (5 μM غلظت نهایی سُند).واکنش های سُند برای ۱۰ دقیقه ادامه یافت و واکنش با اضافه کردن اوریا متوقف شد و برای تجزیه و تحلیل MS پردازش شد.. Samples are analyzed by LC-MS/MS on a linear ion trap mass spectrometer using a time segmented “target list” designed to collect MS/MS spectra from all kinase peptide-probe conjugates that can be detected in HeLa cell lysatesاین لیست هدف با تجزیه و تحلیل جامع HeLa lysates تولید و تأیید می شود.برای استخراج سیگنال برای هر کایناز، تا چهار یون قطعه مشخص برای هر کنژوگیت پپتید پروب کایناز استفاده می شود.، و مقایسه لیزات های مهار کننده با کنترل (بدون درمان) امکان تعیین دقیق درصد مهار در هر نقطه را فراهم می کند.یک متون که جزئیات این روش طیف سنجی توده ای هدفمند را توصیف می کند در حال آماده سازی است [1].

مدیر حیوانات

موش ها [1] سلول های 5×105 هلا در DMEM تعلیق می شوند و به صورت زیر پوست به سمت راست موش های 6 هفته ای Nod / Scid تزریق می شوند (روز 0). در روز دوم (روز 1) پس از تزریق سلول تومور،موش ها به صورت تصادفی به دو گروه (6 حیوان) تقسیم می شوند.گروه XMD8-92 (1-28 روز) با XMD8-92 در دوز 50 mg/kg دو بار در روز تحت فشار خون درمان می شوند.گروه کنترل به عنوان گروه کنترل روزانه تزریق محلول حامل را دریافت می کند.در روز هفتم، گروه کنترل به صورت تصادفی به دو گروه تقسیم می شود (6 حیوان، XMD8-92، 7-28 روز، و 12 حیوان، کنترل).گروه کنترل باقیمانده به صورت تصادفی به دو گروه (6 حیوان) تقسیم می شوند.درمان با XMD8-92 در گروه های XMD8-92 (7-28 روز) و XMD8-92 (14-28 روز) به ترتیب در روز 7 و روز 14 آغاز می شود.اندازه تومور با استفاده از کالیپر اندازه گیری می شود، و حجم تومور تعیین می شود[1].

مرجع:

[1] یانگ کیو، و همکاران. مهار دارویی BMK1 رشد تومور را از طریق پروتئین پرومیلوسیت لیوکیمیا سرکوب می کند. سلول سرطان. 2010 Sep 14;18 ((3):258-67.

[2] یانگ کیو، و همکاران. هدف قرار دادن مسیر BMK1 MAP kinase در درمان سرطان.

[3] Umapathy G، et al. کیناز ALK کیناز ERK5 را تحریک می کند تا بیان آنکوجن MYCN را در نوروبلاستوم افزایش دهد. Sci Signal. 2014 Oct 28;7 ((349):ra102.

اگر به محصولات ما علاقه دارید یا سوالی دارید، لطفاً با ما تماس بگیرید!

محصولات تحت حق ثبت اختراع فقط برای اهداف تحقیق و توسعه ارائه می شوند. با این حال، مسئولیت نهایی فقط بر عهده خریدار است.